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                淺談島津30AD液相色譜常用的定量方法

                更新時間:2022-01-21      點擊次數(shù):851
                 
                  島津30AD液相色譜定量分析是在定性分析的基礎(chǔ)上,需要純物質(zhì)作為標準樣品。液相色譜的定量是相對的定量方法,即:由已知的標準樣品推算出被測樣品的量。
                 
                  島津30AD液相色譜常用的定量方法:
                 
                  1、外標法
                 
                  標準曲線法,分為外標法和內(nèi)標法。外標法在液相色譜中用的最多。內(nèi)標法準確但是麻煩,在標準方法中用的最多。
                 
                  用被測化合物的純品作為標準樣品,配制成一系列的已知濃度的標樣。注入色譜柱的到其響應(yīng)值(峰面積)。
                 
                  在一定范圍內(nèi),標樣的濃度與響應(yīng)值之間存在較好的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標準曲線。
                 
                  在*相同的實驗條件下,注入未知樣品,得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測組分的濃度。
                 
                  外標法的優(yōu)點:
                 
                  操作、計算簡單,是一種常用的定量方法;無需各組分都被檢出、洗脫;需要標樣;標樣及未知樣品的測定條件要一致;進樣體積要準確。
                 
                  外標法缺點:
                 
                  實驗條件要求高,如檢測器的靈敏度,流速、流動相組成的不能發(fā)生變化;每次進樣體積要有好的重復(fù)性。
                 
                  2、內(nèi)標法
                 
                  操作:
                 
                  將已知量的內(nèi)標樣加入標準樣品,制成混合標樣,并配制一系列的已知濃度的工作標樣。混合標樣中標樣與內(nèi)標樣的摩爾比不變。注入色譜柱,以(標樣峰面積/內(nèi)標樣峰面積)為響應(yīng)值。根據(jù)響應(yīng)值與工作標樣濃度之間存在的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標準曲線。
                 
                  將已知量的內(nèi)標樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測組分的濃度。
                 
                  內(nèi)標法的特點:
                 
                  操作過程中樣品和內(nèi)標是混合在一起注入色譜柱的,因此只要混合溶液中被測組分與內(nèi)標的量的比值恒定,上樣體積的變化不會影響影響定量結(jié)果。內(nèi)標法抵消了上樣體積,乃至流動相、檢測器的影響,因此比外標法精確。
                 
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